وقد أخذ أنس عن رسول الله ﷺ الكثير والكثير، ثم استزاد فروي عن أبي بكر وعمر وعثمان وعبد الله بن مسعود وعبد الله بن رواحة وعن فاطمة الزهراء وعبد الرحمن بن عوف، وعن غيرهم من صحابة رسول الله ﷺ.
وروى عنه الحسن البصري وسليمان التيمي وأبو قلابة وأبو مجلز وعبد العزيز بن صهيب، وإسحاق بن أبي طلحة، وأبو بكر بن عبد الله المزني، وقتادة بن دعامة السدوسي، وثابت البناني، ومحمد بن سيرين، وأنس بن سيرين، وابن شهاب الزهري، وربيعة بن عبد الرحمن الشهير بربيعة الرأي ويحيى بن سعيد الأنصاري وسعيد بن جبير وخلق كثير غيرهم.
وكان أنس كثير العبادة قليل الكلام، قال فيه أبو هريرة: «ما رأيت أحدا أشبه صلاة برسول الله ﷺ من ابن أم سليم»، وقد استعمله أبو بكر على زكاة البحرين، ثم استقر به المقام في البصرة بعد المدينة، وصار أنس في البصرة محط أنظار أهل العلم.
١٤٠